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TMB底物顯色試劑盒（可溶型）說明書
Soluble TMB Kit
目錄號：K0050
保存條件：2-8℃保存。
組分說明
Cat No. K0050
Volume 100 ml
TMB 5 ml
TMB-顯色液 100 ml
產(chǎn)品簡介
TMB （3', 3', 5', 5', -四甲基聯(lián)苯胺）是辣根過氧化物酶（HRP）的顯色底物，是目
前HRP系統(tǒng)ELISA實驗的常用顯色試劑。TMB顯色底物工作液在HRP的催化下，形成
藍(lán)色的陽離子產(chǎn)物，在370 nm和652 nm處有主要吸收峰。加酸終止反應(yīng)后，藍(lán)色轉(zhuǎn)變
為黃色，可以在450 nm波長下測定。本試劑盒使用方便，靈敏度高，效果穩(wěn)定，顏色
產(chǎn)物為可溶性，適用于ELISA，不推薦用于IHC實驗。
本產(chǎn)品僅供科研使用，請勿用于臨床診斷及其他用途
注意事項
1．顯色工作液應(yīng)即用即配，放置超過10 min會影響顯色效果。
2．TMB顏色底物顯色后，隨著時間的延長，顏色會逐漸消退，因此顯色并終止反應(yīng)后
應(yīng)盡快讀值，否則會影響檢測的準(zhǔn)確性。
3．以96孔酶標(biāo)板每孔用量100 μl顯色工作液計算，5 ml 20×TMB Kit 可完成1000孔樣品的檢測。
4．本產(chǎn)品僅限于科研，不能用于人體實驗或人體治療。
操作步驟
1．TMB顯色工作液配制：
根據(jù)實驗需用量，將TMB和TMB-顯色液以1：19的比例均勻混合，即配制成為TMB顯色工作液。
2．顯色：
1）經(jīng)HRP標(biāo)記物孵育并充分洗滌后，酶標(biāo)板每孔中加100 μl TMB顯色工作液。
2）室溫避光孵育25-30分鐘，反應(yīng)產(chǎn)物呈藍(lán)色。
3）每孔加50 μl 0.5M H2SO4 終止顯色，此時藍(lán)色產(chǎn)物變?yōu)榱咙S色。
4）將酶標(biāo)板置于酶標(biāo)儀中，450 nm波長下讀取數(shù)據(jù)。
